（一）**熒光標(biāo)記常用的熒光染料

　　FITC（異硫氰酸熒光素）：綠色530nm

　　PE（藻紅蛋白）：橙黃色575nm

　　PerCP（多甲藻黃素葉綠素蛋白）：深紅色675nm

　　PI（碘化丙啶）：橙紅色620nm

　　488nm波長(zhǎng)的氬離子激光激發(fā)

　　APC（別藻青蛋白）：紅色660nm

　　630nm波長(zhǎng)的氦氖激光或紅色二極管激光激發(fā)

Cy3：激發(fā)波長(zhǎng)488nm，*大發(fā)射波長(zhǎng)570nm。1）其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀；2）FL2通道檢測(cè)；3）為小分子染料，非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù)，熒光強(qiáng)度低于PE。

Cy5：激發(fā)波長(zhǎng)633/635nm，*大發(fā)射波長(zhǎng)670nm。1）其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀；2）FL4通道檢測(cè)；3）小分子染料，非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù)，熒光強(qiáng)度低于APC。4）與單核和粒細(xì)胞非特異性結(jié)合多，易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

　?。ǘ?*熒光標(biāo)記

　　常用的標(biāo)記染色為直接**熒光染色和間接**熒光染色。在進(jìn)行雙參數(shù)或多參數(shù)分析時(shí)，常常需要進(jìn)行熒光抗體的組合標(biāo)記，目前已經(jīng)有雙色、三色以及四色標(biāo)記。

　?。ㄈ┘?xì)胞自發(fā)熒光

　　自發(fā)熒光信號(hào)為噪聲信號(hào)，在多數(shù)情況下會(huì)干擾對(duì)特異熒光信號(hào)的分辨和測(cè)量。在**細(xì)胞化學(xué)等測(cè)量中，對(duì)于結(jié)合水平不高的熒光抗體來(lái)說(shuō)，如何提高信噪比是個(gè)關(guān)鍵。一般說(shuō)來(lái)，細(xì)胞成分中能夠產(chǎn)生自發(fā)熒光的分子（例如核黃素、細(xì)胞色素等）的含量越高，自發(fā)熒光越強(qiáng)；培養(yǎng)細(xì)胞中死細(xì)胞／活細(xì)胞比例越高，自發(fā)熒光越強(qiáng)；細(xì)胞樣品中所含亮細(xì)胞的比例越高，自發(fā)熒光越強(qiáng)。