Fluo-4 AM是Fluo-4的乙酰甲酯衍生物，是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fluo-4 AM的熒光非常弱，其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度升高而增強(qiáng)。Fluo-4 AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-4，從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fluo-4可以和鈣離子結(jié)合，結(jié)合鈣離子后可以產(chǎn)生較強(qiáng)的熒光，激發(fā)波長為494nm，發(fā)射波長為516nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長為488nm左右，發(fā)射波長為512-520nm。
1. Fluo-4 AM遇水極易分解，建議**次使用時(shí)，母液分裝并密封保存，同時(shí)注意保持干燥。
2. Fluo-4 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
3. 探針的工作濃度、細(xì)胞量、孵育溫度和時(shí)間等需要根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)預(yù)先摸索。
4. 熒光染料均存在淬滅問題，請(qǐng)盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。