產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品中文名：Helixyte 綠色雙鏈DNA定量檢測試劑盒
產(chǎn)品英文名：Portelite? Fluorimetric DNA Quantitation Kit
產(chǎn)品貨號：17665
產(chǎn)品規(guī)格：100 Tests
產(chǎn)品概述
在進行各種分析的DNA樣品制備中，DNA定量是一項非常重要的任務。 Portelite 熒光DNA定量試劑盒提供了使用Qubit熒光儀操作Helixyte Green BR快速定量dsDNA的方法。它針對Cytocite 和Qubit 熒光儀進行了優(yōu)化。 Portelite 熒光DNA定量測定在三個數(shù)量級上呈線性。該測定法對RNA上的雙鏈DNA（dsDNA）具有高度選擇性，并針對測量10 pg / μL至10 ng / μL的dsDNA濃度進行了優(yōu)化。Helixyte Green-BR與dsDNA結合后表現(xiàn)出較大的熒光增強，并且比UV吸光度讀數(shù)高幾個數(shù)量級。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的Helixyte 綠色雙鏈DNA定量檢測試劑盒。
適用儀器
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量子位熒光計
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Ex:
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480 nm
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Em：
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530 nm
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規(guī)格:
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0.2 mL PCR 小瓶
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CytoCite 熒光計
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Ex:
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480 nm
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Em：
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530 nm
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規(guī)格:
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0.2 mL PCR小瓶
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實驗方案
樣品實驗方案
簡要概述
1. 準備Helixyte Green BR工作溶液
2. 在每個0.2 mL PCR管中加入190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液
3. 在每個試管中添加10 uL DNA標準溶液或測試樣品
4. 在室溫下孵育2分鐘
5. 使用CytoCite 熒光儀或Qubit 檢測熒光
注意：打開之前，請將所有成分置于室溫下。
溶液配制
工作溶液配制
Helixyte Green-BR工作溶液：在DNA分析緩沖液（組分B）中稀釋200倍Portelite dsDNA試劑（組分A）。 例如，要為8個樣品準備足夠的工作溶液，請將5uL Helixyte Green BR（組分A）添加到1mL DNA分析緩沖液（組分B）中。注意：通過用箔紙覆蓋或將其置于黑暗中來保護工作液免受光照。 我們建議在塑料容器中操作而不是玻璃中制備該溶液，因為染料可能會吸附到玻璃表面。 為了獲得好的結果，應在準備后的幾個小時內(nèi)使用此溶液。
實驗步驟
根據(jù)DNA樣品的估計濃度，樣品量可以在1?20 uL的范圍內(nèi)。推薦的樣品量為10 uL，DNA濃度在0.2?100 ng / uL范圍內(nèi)。如果使用其他樣品體積，請在濃度計算中調(diào)整稀釋倍數(shù)。
10 uL樣品體積（DNA濃度在0.2?100 ng / uL范圍內(nèi)）實驗方案。
1. 在每個Cytocite 樣品管（＃CCT100）或等效的0.2 mL PCR管中添加190 uL 1X Helixyte Green BR工作溶液。注意：請使用薄壁聚丙烯透明0.2 mL PCR管，例如＃CCT100。
2. 向每個試管中加入10 μL DNA標準品或測試樣品，然后離心2?3秒進行混合。
3. 將所有試管在室溫下孵育2分鐘。
4. 將樣品插入CytoCite 或Quibit 中，并通過綠色熒光通道檢測熒光。若使用CytoCite，請遵循適用于CytoCite 熒光儀的程序。
標準校準曲線的準備
對于Portelite 分析，您可以選擇使用DNA標準液繪制校正曲線。
1. 在DNA分析緩沖液（成分B）中，用100 ng/uL的DNA標準BR#2（成分D）進行1/3系列稀釋，得到30、10、3、1、0.3、0.1和0 ng/uL的DNA標準稀釋液。
2. 在每個試管中加入190 uL Helixyte Green BR工作溶液。
3. 將10 uL標準液或10 uL樣品添加到0.2 mL PCR管中。
4. 將反應在室溫下孵育2分鐘。
5. 將樣品插入CytoCite ，并通過綠色熒光通道檢測熒光。
圖示
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圖1.使用具有寬動態(tài)范圍的Portelite 熒光DNA定量試劑盒生成的DNA標準曲線。 使用綠色熒光通道定量熒光強度，使用線性擬合計算回歸模型。
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