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技術(shù)文章

百螢問答之鈣離子熒光探針腔腸素的工作原理是怎樣的

鈣測量對于許多生物學研究至關(guān)重要,鈣離子熒光探針腔腸素是進行鈣測量的有效工具,跟著小螢一起看看它是怎么工作的吧。

 

1.百螢 鈣離子熒光探針腔腸素工作原理


水母發(fā)光蛋白復(fù)合物包含22kD的載水母發(fā)光蛋白,分子氧和發(fā)光體腔腸素。當三個Ca2 +離子與該配合物結(jié)合時,腔腸素被氧化為腔腸酰胺,并伴有二氧化碳和藍光的釋放。水母發(fā)光蛋白的生物發(fā)光對Ca2 +濃度的大約三次方依賴性,可以在?0.1 μM至> 100 μM的寬檢測范圍內(nèi)測量Ca2 +濃度。與熒光Ca2 +指示劑不同,可以檢測Ca2 +結(jié)合的水母發(fā)光蛋白而無需照亮樣品,從而自發(fā)熒光的干擾。天然腔腸素及其衍生物賦予水母發(fā)光蛋白復(fù)合物不同的Ca2 +親和力和光譜性質(zhì)。據(jù)報道,用腔腸素hcp重組的重組載脂蛋白水泡蛋白總體上具有發(fā)光,同時具有高量子產(chǎn)率和快速響應(yīng)時間。但是,腔腸素類似物在細胞內(nèi)重建水母發(fā)光蛋白可能相對較慢。含有腔腸素的cp,f或h形式的水母發(fā)光蛋白顯示的發(fā)光強度是用天然腔腸素重構(gòu)的脫輔基水母發(fā)光蛋白的發(fā)光強度的10-20倍。腔腸素h和cp已用于GPCR的HTS篩選測定中。


鈣離子熒光探針腔腸素化學結(jié)構(gòu)


2.百螢 鈣離子熒光探針腔腸素參數(shù)

Ex(nm)      429

Em(nm)      466

分子量      423.46

       Ethanol

存儲條件    保存在-15℃以下,避光防潮

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