與Fluo-4等單波長探針不同，對于Ca2+，F(xiàn)ura探針的吸收（或熒光激發(fā)）從380 nm（Fura-2），415 nm（Fura-8和Fura-10）轉(zhuǎn)變，與Ca2+結(jié)合的無螯合劑可達到約340 nm（Fura-2），355 nm（Fura-8和Fura-10），熒光發(fā)射的波長相對獨立于Ca2+濃度。通過使用在340nm和380nm（對于Fura-2），355nm和415nm（對于Fura-8和Fura-10）進行激發(fā)并分配熒光強度來獲得Ca2+依賴性熒光信號的動態(tài)范圍在?510 nm（Fura-2），525 nm（Fura-8和Fura-10）處檢測到。根據(jù)該比率，可以使用從校準曲線得出的解離常數(shù)（Kd）估算細胞內(nèi)Ca2+的水平。通過使用在兩個波長下激發(fā)產(chǎn)生的熒光強度之比，諸如染料分布不均勻和光致漂白等因素將被小化，因為它們應(yīng)在相同程度上影響兩種測量。校準溶液開始應(yīng)不含重金屬離子，例如錳，這可能會影響其熒光和對鈣的親和力。百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供的Fura-10，鉀鹽。